仪器的基本信息:
仪器名称:双向荧光差异凝胶电泳系统(2D-DIGE) 及分析软件
英文名称:Two-dimensional fluorescence difference in gel electrophoresis,2D-DIGE and analysis software
型 号:
Ettan DIGE 2D & DeCyder
购买年份:2012年
存放地点:公共实验平台
管理人员:陈丽
产 地:瑞典制 造 商:
GE联系电话:027-87700819
仪器的用途:
荧光差异蛋白表达分析系统在传统双向电泳技术的基础上,结合了多重荧光分析的方法,在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品,并第一次引入了内标的概念,极大地提高了结果的准确性,可靠性和重复性。在DIGE技术中,每个蛋白点都有它自己的内标,并且软件全自动根据每个蛋白点的内标对其表达量进行校准,保证所检测到的蛋白丰度变化是真实的。DIGE技术可检测到样品间小于10%的蛋白表达差异,统计学可信度达到95%以上。采用DIGE技术,通过对不同类型,不同个体的细胞、组织、或经过不同处理和不同生长条件下蛋白质表达差异分析,在分子生物学及蛋白质功能研究等方面都有广泛的应用。
仪器的技术参数:
1 荧光差异凝胶分析软件
1.1全自动进行多色荧光图像的找点、背景扣除、凝胶之间匹配和蛋白点分析。
1.2找点过程无需人工图像编辑,确保同一凝胶上不同荧光素标记的图像中相同点大小形状完全一致。
1.3同一凝胶上不同荧光素标记的图像不需要匹配,胶之间的匹配通过内标的匹配来实现,确保实验结果精确性。
1.4采用内标的方法全自动进行每个点和每个差异的统计学分析和数据归一化。
1.5有批处理功能,最多可以处理≥500对图像。
1.6可信度可达>95%的情况下,常规检测到10%的蛋白表达差异。
1.7 胶内差异分析模块(DIA):检测一块胶中完全重叠的三幅图像,采用专利算法进行共找点,得到一致精确的比值计算
1.8 生物学差异分析模块(BVA):在凝胶之间进行匹配。并检测所有凝胶上样品之间的差异,应用统计学计算每个差异的可信度水平
1.9扩展数据分析模块(EDA),对BVA数据进行高端统计分析,通过生成不同的数据组,快速分析DIGE数据
1.10软件中界面中的凝胶视图、点发布图、3D视图与数据表格之间具有动态链接。
1.11 采用数据库Oracle进行数据管理,确保数据安全性。
1.12对每个点都进行 t-检验,1way 和 2 way ANOVA 统计
1.13 软件版本为7.0版
2 第一向等电聚焦电泳系统 Ettan IPGphor 3
2.1 功率:12W ;电压:0 - 10000 V
2.2 电极区:铜镀金表面
2.3 胶条槽容量:最多12 个相同长度的胶条槽
2.4 程序参数:溶胀时间, 电泳平台温度, 每根胶条最大电流极限, 升压设定, 电压上升模式和电压持续时间。主机可生成10个方法, 每个方法可以多达 9步;通过电脑可以生成、存储和编辑任何数目的方法
3 大型垂直电泳槽
3.1 凝胶容量:在一个电泳槽中同时运行 1 到 6 块胶,适合7-24cm任何长度的一向胶条
3.2 最大凝胶尺寸:26 x 20cm, 1.0mm 厚
3.3 电泳缓冲液体积:阳极:4.5 升;阴极:0.8升
3.4 内置缓冲液循环泵,流速10L/min
3.5 制冷:通过陶瓷热交换器
3.6 灌胶模具:一次同时灌 1到 6块胶,内含分隔片和填充片,方便卸胶,节省胶液